線粒體膜電位(MMP)檢測實驗原理

線粒體在產(chǎn)生能量時會將電化學(xué)勢能儲存于線粒體內(nèi)膜，在內(nèi)膜兩側(cè)，若質(zhì)子及其他離子濃度的不對稱分布就會形成線粒體膜電位。

線粒體膜電位(MMP)檢測服務(wù)介紹

大量的研究表明線粒體與細(xì)胞凋亡密切相關(guān)，其中線粒體跨膜電位（MMP）的下降，被認(rèn)為是細(xì)胞凋亡級聯(lián)反應(yīng)過程中早發(fā)生的事件之一。它發(fā)生在細(xì)胞核凋亡特征（染色質(zhì)濃縮、DNA斷裂）出現(xiàn)之前,一旦線粒體跨膜電位崩潰，則細(xì)胞凋亡不可逆轉(zhuǎn)。

實驗流程

1.細(xì)胞培養(yǎng)；

2.用適當(dāng)?shù)姆椒ㄕT導(dǎo)細(xì)胞凋亡，同時設(shè)立陰性依照組合陽性對照組，收集細(xì)胞；

3.用PBS洗滌細(xì)胞三次，收集不多于1×106的細(xì)胞；

4.取100μL10×Incubation Buffer加900μL滅菌去離子水稀釋成1×Incubation Buffer，混勻并預(yù)熱至37℃；

5.吸取500μL 1×Incubation Buffer，加入1μL JC-1，渦旋混勻配成JC-1工作液；

6.取500μL JC-1工作液將細(xì)胞均勻懸浮，37℃，5% CO2的培養(yǎng)箱中孵育15~20min；

7.室溫離心（2000rpm,5min）收集細(xì)胞，用1×Incubation Buffer洗兩次；

8.吸取500 μL 10×Incubation Buffer重新懸浮細(xì)胞；

9.流式細(xì)胞儀檢測，分析。