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細(xì)胞克隆

細(xì)胞克隆

簡要描述:
品牌自營品牌產(chǎn)地類別國產(chǎn)
應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè)
細(xì)胞克隆:軟瓊脂克隆,克隆形成率反映細(xì)胞群體依賴性和增殖能力兩個重要性狀。細(xì)胞包克隆化其他方法 1.稀釋鋪板方法 2.飼養(yǎng)層克隆法 3.毛細(xì)管克隆法 4.熒光激活分選法。

更新時間:2023-10-30

訪問量:2203

廠商性質(zhì):其他

軟瓊脂克隆:克隆形成率反映細(xì)胞群體依賴性和增殖能力兩個重要性狀
實(shí)驗步驟
1.獲取樣本,培養(yǎng)細(xì)胞,
2.調(diào)整細(xì)胞懸液密度為1x103個/ml細(xì)胞。
3.制備底層瓊脂,*溶化的5%瓊脂和37*C左右預(yù)溫的新鮮*培養(yǎng)液以1: 9比例在40^C均勻混合,加入培養(yǎng)皿(直
徑60mm)中,每皿含0.5%瓊脂培養(yǎng)基2ml,室溫下瓊脂*凝固。
4.制備上層瓊脂,37C密度每皿含200個的細(xì)胞懸液1.5m移入小燒杯中,加入40C、5%瓊脂等體積混勻,即成0.25%半固
體瓊脂培養(yǎng)基。配好的半固體瓊脂培養(yǎng)基立即加入鋪有底層瓊脂的培養(yǎng)皿中,室溫下瓊脂凝固。37C、5%CO2靜置培養(yǎng)2-
3周。
5.當(dāng)培養(yǎng)皿中出現(xiàn)肉眼可見克隆時,終止培養(yǎng),棄去培養(yǎng)液,PBS液小心浸洗2次,空氣干燥。甲醇固定15分鐘,棄甲醇后
空氣干燥。用Giemsa染液染色10分鐘,流水緩慢洗去染液,空氣干燥。

 實(shí)驗周期及交付標(biāo)準(zhǔn)
1.實(shí)驗周期: 1-2周
2.交付標(biāo)準(zhǔn):克隆形成圖片、計數(shù)結(jié)果、柱狀圖、實(shí)驗報告(實(shí)驗步驟、試劑、儀器等)
細(xì)胞包克隆化其他方法
1.稀釋鋪板方法
2.飼養(yǎng)層克隆法
3.毛細(xì)管克隆法
4.熒光激活分選法

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